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    實驗室離心機離心方法介紹

    發布者:北京時代北利離心機有限公司 發布日期:2018-8-20 11:55:51

    實驗室離心機分離方法不一,適用場合也不盡相同。目前zui主流的離心分離方法主要是差速離心法和區帶離心法,其實在實驗室離心技術制備超離心法一文中有提及兩種離心方法,今天筆者對這兩種方法的原理及應用介紹進行補充和完善。

    1. 差速離心法:許多具有生物活性的生物大分子和亞細胞器是不穩定的,需要低溫高速離心,zui常用的是差速離心法。通過離心后倒出上清液和沉淀分開,把分離出來的上清液再增大轉速離心,分離出第二部分沉淀,這樣不斷增大轉速,逐級分離出所需要的物質。利用這種方法可以有效地分離大小上差別較大的顆粒,但不能分離大小相似的顆粒,而且所分離出來的組分往往是不均一的,雜有其他種類的顆粒。

    2.區帶離心法:其中又可以分為兩種:速率區帶離心和等密度速率區帶離心。
     1) 速率區帶離心法:這是將小量懸液放在一平緩的密度梯度液上,用此梯度液來穩定顆粒的沉降。由于離心,顆粒離開起始區帶而移動,移動的速度是由顆粒的大小、形狀和它們所受實驗室離心機的離心力來決定的。離心一段時間歷,各種穎粒將按照它們的相對速度移動而各個分開,成為一系列區帶。用這種方法我們可以將沉降速度差為20%或者更大的顆粒。

    2)等密度區帶離心法:這是將要分離的顆粒懸液放至密度梯度液上,或者實際上將顆粒溶于制作梯度的溶液中。通過離心,顆;蛘呱细』蛘呦鲁,達到與它們自己密度相同的液體處在這里它們沒有重量,不管離心多長時間,它們再也不移動了。這些顆?沙蔀橐幌盗袇^帶,每種顆粒在它自己的密度區。所以,這是一種利用顆粒浮密度的大小分離顆粒大小的方法。使用的介質通常是氯化銫(Cscl)和硫酸銫(Cs2SO4)。前者適合于DNA分離,后者適合于RNA分離。這種方法與速率區帶離心法相比,它有一個主要的缺點是在離心期間,顆粒不可避免地暴露在高濃度的梯度溶液中,會引起顆粒的部分損傷,并可能出現相當于損傷顆粒的一些額外的區帶。


     

     

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